产品与服务

【产品名称】：灵芝提取物

【英文名称】：Ganoderma Lucidum Extract

【使用部位】：本品为多孔菌科真菌赤芝Ganoderma lucidum(Leyss.exFr.)Karst.或紫芝Ganoderma sinense Zhao，Xu et Zhang的干燥子实体。

【主要成分】：主要成分为氨基酸、多肽、蛋白质、真菌溶菌酶（fungal lysozyme），以及糖类（还原糖和多糖）、麦角甾醇、三萜类、香豆精甙、挥发油、硬脂酸、苯甲酸、生物碱、维生素B2及C等；孢子还含甘露醇、海藻糖（trehalose）。

【原料来源】：主要产区黑龙江，吉林，贵州，云南，陕西，四川等。全年采收，除去杂质，剪除附有朽木、泥沙或培养基质的下端菌柄，阴干或在40〜0°C烘干。外形呈伞状，菌盖肾形、半圓形或近圆形，直径10〜8cm，厚1〜2cm。皮壳坚硬，黄褐色至红褐色，有光泽，具环状棱纹和辐射状皱纹，边緣薄而平截，常稍内卷。菌肉白色至淡棕色。菌柄圆柱形，侧生，少偏生，长7〜15cm，直径1〜.5cm，红褐色至紫褐色，光亮。孢子细小，黄褐色。栽培品子实体较粗壮、肥厚，直径12〜2cm，厚1.5cm〜4cm。皮壳外常被有大量粉尘样的黄褐色孢子。

【存储条件】：避光储存于密封容器中

【原料采购标准】

【产品规格】：灵芝中含氨基酸、多肽、蛋白质、真菌溶菌酶（fungal lysozyme），以及糖类（还原糖和多糖）、麦角甾醇、三萜类、香豆精甙、挥发油、硬脂酸、苯甲酸、生物碱、维生素B2及C等；孢子还含甘露醇、海藻糖（trehalose）。市场常见规格为

【外观】：浅黄棕色可流动性粉末，有本品固有的香气，味苦；

【目数】：30~100目，也可根据客户要求

【含量测定方法】：

灵芝提取物水溶性粗多糖的测定方法

1.范围

本方法规定了灵芝提取物中以葡聚糖为主要结构分子量在10000以上的水溶性粗多糖的测定方法。

本方法最低检出浓度：5.0mg/L。

本方法线性范围：5.0ug/mL—200ug/mL。

2.原理

食品中分子量>10000的高分子物质在80%乙醇溶液中沉淀，与水溶液中单和低聚糖分离，用碱性二价铜试剂选择性的从其它高分子物质中沉淀具有葡聚糖结构的水溶性多糖，用苯酚-硫酸反应以碳水化合物形式比色测定其含量，其颜色强度与水溶性粗多糖中葡聚糖的含量成正比，以葡萄糖为标准参照物并以此计算食品中水溶性粗多糖含量。

3．试剂

本方法所用试剂除特殊注明外，均为分析纯；所用水为去离子水或同等纯度蒸馏水。

3.1 乙醇溶液(80%):20mL水中加入无水乙醇80mL，混匀。

3.2 氢氧化钠溶液(100g/L):称取100g氢氧化钠，加水溶解并稀释至1L，加入固体无水硫酸钠至饱和，备用。

3.3 铜试剂储备液:称取3.0gCuSO4.5H2O，30.0g柠檬酸钠，加水溶解并稀释至1L，混匀备用。

3.4 铜试剂溶液：取铜储备液50mL，加水50mL，混匀后加入固体无水硫酸钠12.5g并使其溶解。临用新配。

3.5 洗涤剂：取水50mL，加入10mL铜试剂溶液，10mL氢氧化钠溶液，混匀，临用新配。

3.6 硫酸溶液（10%）：取100mL浓硫酸加入到800mL左右水中，混匀，冷却后稀释至1L。

3.7 苯酚溶液（50g/L）：称取精制苯酚5.0g，加水溶解并稀释至100mL，混匀。溶液置冰箱中可保存一月。

3.8 葡萄糖标准储备溶液:精密称在硫酸干燥器中干燥至恒重的葡萄糖标准0.5000g，加溶解，并定容至50mL，混匀，置冰箱中保存。此溶液每毫升含10.0mg葡萄糖。

3.9 葡萄糖标准使用液:吸取葡萄糖标准储备液1.00mL，置于100mL容量瓶中，加水至刻度，混匀，置冰箱中保存。此溶液每毫升含葡萄糖0.10mg。

4．仪器

4.1 分光光度计

4.2 离心机

4.3 旋转混匀器

5.分析步骤

5.1 标准曲线制备:

精密吸取葡萄糖标准使用液0.00，0.10，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00 mL(相当于葡萄糖，0.010，0.020，0.040，0.060，0.080，0.10mg)分别置于25mL比色管中，准确补充水至2.0mL，加入50g/L苯酚溶液1.0mL，在旋转混匀器上混匀，小心加入浓硫酸10.0mL，于旋转混匀器上小心混匀，置沸水浴中煮沸2min.，冷却后用分光光度计在485nm波长处以试剂空白溶液为参比，1cm比色皿测定吸光度值。以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。

5.2 试样处理

5.2.1 试样提取:称取混合均匀的固体试样2.0g，置于100mL容量瓶中，加水80mL左右，于水浴上加热2h，冷却至室温后补加水至刻度，混匀，过滤，弃去初滤液，收集余下滤液供沉淀多糖。

5.2.2 沉淀粗多糖:精密取5.2.1滤液5.0mL或液体试样5.0mL，置于50mL离心管中，加入无水乙醇20mL，混匀5min.，以3000rpm离心5min.，弃去上清液。残渣用80%乙醇溶液数毫升洗涤，离心后弃上清液，反复3—4次操作。残渣用水溶解并定容至5.0mL，混匀，供沉淀葡聚糖。

5.2.3 沉淀葡聚糖:精密取5.2.2溶液2mL置于20mL离心管中，加入100g/L氢氧化钠溶液2.0mL，铜试剂溶液2.0mL，沸水浴中煮沸2min.，冷却后以3000rpm离心5min.，弃去上清液。残渣用洗涤液数毫升洗涤，离心，弃去上清液，反复3次操作，残渣用100mL/L硫酸溶液2.0 mL溶解并转移至50mL容量中，加水稀释至刻度，混匀。此溶液为试样测定液。

5.3 试样测定:精密吸取试样测定液2.0 mL置于25 mL比色管中，加入50g/L苯酚溶液1.0 mL，在旋转混匀器上混匀后，小心加入浓硫酸10.0mL后于旋转混匀器上小心混匀，置沸水浴中煮沸2min.，冷却至室温，用分光光度计在485nm波长处，以试剂空白为参比，1cm比色皿测定吸光度值。从标准曲线上查出葡萄糖含量，计算试样中水溶性粗多糖含量。同时作试样空白实验。

5．4 分析结果表述

试样中水溶性粗多糖的含量按式（5.4.1）计算。

5．4．1 计算

式中:

x—试样中水溶性粗多糖含量(以葡萄糖计)，mg/g;

m1---试样测定液中葡萄糖的质量，mg;

m2---试样空白液中葡萄糖质量，mg;

m---试样质量，g;

V1---试样提取液总体积，mL;

V2---沉淀粗多糖所用试样提取液体积，mL;

V3---粗多糖溶液体积，mL;

V4---沉淀葡聚糖所用粗多糖溶液体积，mL;

V5--试样测定液总体积，mL;

V6---测定用试样测定溶液体积，mL。

5．4．2 结果表示

计算结果保留两位有效数字。

6.技术参数

回收率：不同食品中不同浓度加标回收的回收率为87.8～110.8%。

精密度：同一试样10次测定结果的RSD为5.8%。

干扰因素：测定过程中避免碳水化合物的玷污干扰。

灵芝提取物三萜皂甙的检测方法

1，对照品溶液的制备取齐墩果酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含0.2mg的溶液，即得。

2，标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml，分别置15ml具塞试管中，挥干，放冷，精密加入新配制的香草醛冰醋酸溶液(精密称取香草醛0.5g，加冰醋酸使溶解成10ml，即得）0.2ml，摇勻，在70°C水浴中加热15分钟，立即置冰浴中冷却5分钟，取出，精密加入乙酸乙酯4ml，摇匀，以相应试剂为空白，照紫外-可见分光光度法(通则0401)，在546nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标绘制标准曲线。

3，供试品溶液的制备取本品粉末约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加乙醇50ml，超声处理（功率140W，频率42kHz)45分钟，滤过，滤液置100ml量瓶中，用适量乙醇，分次洗涤滤器和滤渣，洗液并人同一量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，即得。

4，测定法精密量取供试品溶液0.2ml，置15ml具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法，自“挥干”起，同法操作，测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中齐墩果酸的含量，计算，即得。